Общият микробен брой е нормален. Определяне на микробното число на водата (лабораторна работа)

Цел на работата:проучване на методи за оценка на санитарно-бактериологичното състояние на питейната вода и водата от природните водоеми.

Водата, използвана в предприятията на хранително-вкусовата промишленост, трябва да отговаря на изискванията за питейна вода в действащите нормативни документи. Безопасността на водата в епидемиологично отношение се определя от общия брой микроорганизми и броя на колиформните бактерии в определен обем.

Качеството на водата в централизираните системи за питейна вода се определя в съответствие със санитарните правила и норми. Питейната вода трябва да бъде безопасна в епидемиологично и радиационно отношение, безопасна по химичен състав и да има благоприятни органолептични свойства (Таблица 12.1).

Индикатори

* PFU - плакообразуващи единици.

12.1. Вземане на проби и подготовката им за анализ

Водата за санитарен и бактериологичен контрол се взема в количество от 500 cm 3 в бутилки, предварително стерилизирани в хартиени торби, с памучно-марлева запушалка, покрита с хартиена капачка.

Преди вземане на проба кранът или ръбът на тръбата се изгарят със запален памучен тампон, напоен с алкохол. Отворете крана и източете водата за 10-15 минути, след което вземете проба. Водата трябва да се анализира не по-късно от 2 часа след вземането на пробата.

Водни проби от открити водоеми - кладенци, басейни, реки, езера - се вземат с помощта на батометри, които представляват метална рамка с масивно оловно дъно - мивка. В металната рамка е поставена бутилка. Бутилкомерът се потапя на предварително определена дълбочина и бутилката се отваря чрез издърпване на въже, завързано за тапата. След напълване на бутилката бутилката се изважда и затваря със стерилна запушалка.

Пробите от хлорирана вода се вземат в бутилки с дехлоратор, тъй като микробите във водата умират под въздействието на хлор. Като дехлоратор се използва натриев сулфид в количество 10 mg на 500 cm3 вода, която се тества.

Към избраните водни проби се прилага придружителен документ, в който са посочени съответните данни. Пробите от питейна вода се доставят в хладилни контейнери при температура от 4 до 10 °C.

12.2. Определяне на общото микробно число на водата

Общ микробен брой (TMC) -това е броят на мезофилните аеробни и факултативно анаеробни микроорганизми, които образуват колонии върху месопептонен агар при инокулиране на 1 cm 3 вода с последваща инкубация на културите при температура 37 ± 0,5 ° C в продължение на 48 часа, TMC не трябва да бъде повече над 50 CFU/cm3.

В зависимост от степента на предполагаемо замърсяване се инокулират най-малко два различни обема вода, подбрани така, че върху съдовете да растат от 30 до 300 колонии. Чешмяната и артезианската вода се засяват неразредени на 1 cm3. При бактериологично изследване на замърсени води се правят посявки от разредена вода. Разрежданията се приготвят, както е описано в точка 8.3.

От тестовата проба и от епруветките с нейните разреждания, в съответствие със степента на очакваното микробно замърсяване, се взема 1 cm 3, добавя се в стерилни петриеви панички и се излива в 10-12 cm разтопен и охладен до температура 45 ° C месопептонен агар. С кръгови движения на ръката, въртейки чашите по хоризонталната повърхност на масата, разпределете съдържанието им на равномерен слой по цялата повърхност на дъното. След като агарът се втвърди, блюдата с инокулациите се поставят в термостат при 37 °C за 24 часа. След инкубацията се преброява броят на порасналите колонии.

Определянето на микробния брой с помощта на този метод ни позволява да идентифицираме само мезофилни аеробни и факултативно анаеробни микроорганизми.

12.3. Определяне на колиформни бактерии във вода

От епидемиологична гледна точка особено важно е откриването на патогенни микроорганизми във водата - причинители на чревни инфекции (коремен тиф, дизентерия, холера и др.) Но поради голямата трудност при откриване на патогенни микроорганизми по време на бактериологични анализи те са ограничени до дефиницията на така наречените санитарни показателни микроорганизми (SIM). Санитарните показатели включват микроорганизми, които постоянно присъстват в естествените кухини на хора или животни. Наличието на SPM в различни обекти на околната среда е индикатор за тяхното замърсяване от хората. Колкото повече SPM във външната среда, толкова по-вероятно е наличието на специфични патогени на инфекциозни заболявания.

Бактериите Escherichia coli (колиформи) са от голямо значение като SPM. Групата на Escherichia coli включва колиформни бактерии от родовете Escherichia, Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella, Serratia.

При определяне на количеството SPM във водата се използват следните характеристики:

. коли титър -най-малкият обем вода, в който се намира една Е. coli. За питейна вода, претърпяла пречистване, титърът на E. coli трябва да бъде най-малко 300 cm 3;

. коли индекс -броя на Е. coli в 1 dm3 вода. Коли индексът за питейна вода трябва да бъде не повече от 3.

Колиформните бактерии се определят във вода чрез метода на мембранния филтър или метода на ферментация.

Метод на ферментация.Същността на метода на ферментация е да се инокулират определени обеми тестова вода, да се инкубират

култури при температура 37 °C в среда за натрупване, последвано от засяване върху среда Endo, диференциране на израсналите колонии и определяне на най-вероятния брой колиформи в 1 dm 3 вода.

При изследване на вода от централизирано водоснабдяване, изследваният материал се инокулира два пъти в три обема: 100, 10 и 1 cm3. За изследване на вода от реки, езера и езера се приготвят десетократни разреждания 1:10, 1:100, 1:1000 и се инокулират още 10 cm3 и 1 cm3 без разреждане. Водата се инокулира във ферментационни съдове (колби, бутилки, епруветки с поплавъци), пълни с глюкозо-пептонна среда на Eijkman. Културите се инкубират в термостат при 37 °C за 24 часа.

а) при липса на образуване на газ и промени в цвета на средата, дайте отрицателен отговор за наличието на колиформи в тестовия обем вода, давайки право на завършване на изследването след 24 часа;

б) когато се образуват киселина и газ, материалът се засява от ферментационните съдове върху средата Endo. Засяването се извършва с бактериологична бримка с дебел ход, за да се получат изолирани колонии. Съдовете с инокулациите се инкубират при 37 °С за 24 ч. След инкубацията инокулациите се изследват. Отсъствието на колонии, характерни за E. coli върху средата Ендо, дава основание за даване на отрицателен отговор и прекратяване на изследването;

в) ако се открият лактозо-положителни тъмночервени колонии върху средата Endo, със или без метален блясък, е необходимо да се установи дали отглежданите микроорганизми принадлежат към семейството на чревните бактерии. За целта се прави микроскопия на пробата от колониите и се прави оксидазен тест.

Тест за оксидазапредложи да се разграничат бактериите от семейството Enterobacteriaceae от грам-отрицателните бактерии от семейството Pseudomonodaceae и други водни сапрофити, които, за разлика от чревните бактерии, произвеждат ензима оксидаза.

За да се извърши оксидазен тест, 2-3 колонии от всеки тип се отстраняват от средата Endo с примка. Микробната маса се нанася върху филтърна хартия, навлажнена със специален реагент (30 g α-d-нафтол се разтварят в 2,5 cm 3 етанол, добавят се 7,5 cm 3 дестилирана вода и 40 mg диметил-парафенилендиамин. Разтворът се приготвен непосредствено преди определяне).

Ако резултатът от оксидазния тест е отрицателен, хартията не променя цвета си при контакт с колонията. Ако хартията стане синя в рамките на 1 минута при контакт с колонията, тогава оксидазният тест се счита за положителен.

Наличието в препарата на грам-отрицателни неспорообразуващи пръчици, които нямат оксидазна активност, позволява незабавно да се даде отговор за наличието на колиформни бактерии във водата.

Ако се открият розови и безцветни колонии в среда Endo, пребройте и субкултивирайте 2-3 изолирани колонии от всеки тип в глюкозо-пептонна среда на Eijkman. Културите се инкубират при температура 37 ° C в продължение на 3-4 часа.Ако се образува киселина (промяна в цвета на средата) и се натрупа газ в поплавъка, резултатът се счита за положителен, при липса на киселина и образуване на газ , резултатът се счита за отрицателен.

След анализа крайните резултати (положителни и отрицателни) за всеки инокулиран обем се записват в лабораторния дневник и се определят коли-титър и коли-индекс.

Метод на мембранен филтър.Същността на метода е да се концентрират бактерии от определен обем вода върху мембранни филтри, последвано от отглеждането им в среда Endo при температура 37 ° C, диференциране на отглежданите колонии и отчитане на количеството колиформи в 1 cm 3 вода .

Приготвяне на мембранни филтри.За да филтрирате водата, изберете мембранни филтри № 3, поставете ги в дестилирана вода, загрята до температура 80 ° C и поставете на слаб огън да заври. Варенето се извършва три пъти по 10 минути. След първото и второто преваряване водата се източва, а след третото филтрите се оставят във водата до използване.

Подготовка на филтърния апарат.Филтърният апарат се стерилизира в автоклав или се избърсва с памучен тампон, напоен със спирт и се запалва за стерилизация. На масата на филтърния апарат се поставя мембранен филтър с помощта на стерилни пинсети. За да предотвратите повреда на филтъра, поставете кръг от стерилна филтърна хартия под него. Горната част на устройството - фуния - се монтира и закрепва върху филтърната маса с поставените върху нея филтри (фиг. 12.1).

Ориз. 12.1. Определяне на броя на микроорганизмите по метода на мембранния филтър

Филтриране на вода и отглеждане на микроорганизми.Пробният обем вода се излива стерилно във фунията на филтърния апарат и в приемния съд се създава вакуум с помощта на водоструйна помпа. При анализ на питейна вода, постъпваща във водоснабдителната мрежа, е необходимо да се вземе обем най-малко 333 cm 3. В края на филтрирането мембранният филтър се пренася с пламтяща пинсета върху повърхността на хранителната среда Endo в петриеви панички. В момента те произвеждат филтри, импрегнирани с подходящи хранителни среди. Посевите се инкубират в термостат при температура 37 °C за 18-24 часа.

Обработка на резултатите от анализа.В края на инкубацията посевите се изследват и се правят следните заключения:

а) липсата на микробен растеж върху филтрите или откриването на колонии върху тях, които не са характерни за колиформите, позволява изследването да завърши на този етап от анализа с отрицателен резултат за наличие на колиформи в анализирания обем вода ;

б) ако върху филтъра се открият колонии, характерни за колиформни бактерии, изследването продължава. Приготвят се натривки от няколко колонии от всеки тип, оцветяват се по Грам и се изследват под микроскоп. Липсата на малки грам-отрицателни неспорови пръчици в цитонамазките е основание за спиране на анализа с отрицателен резултат за наличие на колиформни бактерии в тестовия обем вода;

в) при наличие на грам-отрицателни бацили в намазките, морфологично подобни на чревните бацили, се прави оксидазен тест. Ако върху мембранните филтри се открият лактозо-положителни колонии от същия тип (тъмночервени с или без метален блясък), които не произвеждат оксидаза, анализът на водата приключва на този етап и броят на колониите от Е. coli, отглеждани върху мембранен филтър се брои. Резултатът се изразява като коли индекс по отношение на 1 dm 3 вода;

г) ако върху мембранните филтри се открият розови и безцветни колонии, техният брой се преброява и 2-3 изолирани колонии от всеки тип се субкултивират в глюкозо-пептонна среда на Eijkman. След инкубиране в продължение на 3-4 часа при температура 37 °C се отбелязва промяна в цвета на средата поради образуването на киселина и натрупване на газ в поплавъка. В този случай резултатът се счита за положителен. Ако няма промени в средата, тогава те дават отрицателен резултат за наличие на колиформни бактерии.

Примеропределяне на коли индекса: филтрират се три обема вода от 100 cm 3 . Три колонии растат на първия и втория филтър, а девет колонии растат на третия. Израснаха общо петнадесет колонии. Така коли индексът на изследваната водна проба е равен на: (1000 x 15): 300 = 50. Коли индексът се преобразува в колилитър, както следва: 1000: 50 = 20.

Контролни въпроси

1. Какви показатели за епидемиологична безопасност на питейната вода познавате?

2. Какъв е общият микробен брой, colititr и coli индекс?

3. Кои родове микроорганизми са включени в колиформите?

4. Какви методи се използват за определяне на колиформни бактерии?

5. Какви са основните критерии, използвани за определяне наличието на колиформни бактерии в питейната вода?

6. Каква е целта на оксидазния тест?

При този метод за анализ на водата определено количество вода преминава през специална мембрана с размер на порите около 0,45 микрона. В резултат на това всички бактерии във водата остават на повърхността на мембраната. След което мембраната с бактерии се поставя за определено време в специална хранителна среда при температура 30-37 o C. През този период, наречен инкубационен период, бактериите са способни да се размножават и да образуват ясно видими колонии, които могат вече лесно се преброяват. В резултат на това можете да наблюдавате следното: Или дори тази картина: Тъй като този метод за анализ на водата включва само определяне на общия брой колонии - образуващи бактерии от различни видове, тогава въз основа на неговите резултати е невъзможно да се прецени ясно наличието на патогенни микроби във водата. Но високото микробно число показва общо бактериологично замърсяване на водата и висока вероятност за наличие на патогенни организми.

При анализ на водата е необходимо да се контролира не само съдържанието на токсични химикали, но и броят на микроорганизмите, които характеризират бактериологичното замърсяване на питейната вода TMC - общо микробно число , В централизираната водоснабдителна вода този брой не трябва да надвишава 50 CFU /ml, а в кладенци и сондажи - не повече от 100 CFU/ml

Санитарно-микробиологичното изследване на водата се извършва по план
ред за целите на текущо наблюдение, както и за специални епидемиологични
ким индикации. Основните обекти на такова изследване са:

Питейна вода от централен водопровод (чешмяна вода);

Питейна вода от нецентрализирано водоснабдяване;

Води от повърхностни и подземни водоизточници;

отпадъчни води;

Вода на крайбрежните зони на моретата;

Вода в плувен басейн.

Основните показатели за оценка на микробиологичното състояние на питейната вода съгласно действащите нормативни документи са:

1. Общо микробно число (ТМЧ) - броят на мезофилните бактерии в 1 ml вода.

Ако титърът- най-малкият обем вода (в ml), в който е открит поне един жив организъм
микробна клетка, свързана с колиформи.
Колиформен индекс- количеството колиформи в 1 литър вода.

3. Броят на спорите на сулфит-редуциращи клостридии в 20 ml вода.

4. Брой колифаги в 100 ml вода.

Определянето на TMC позволява да се оцени нивото на микробиологично замърсяване на питейната вода. Този индикатор е незаменим за спешно откриване на масивно микробно замърсяване.

Общо микробно число- това е броят на мезофилните аеробни и факултативно анаеробни микроорганизми, способни да образуват колонии върху хранителен агар при температура 37 °C за 24 часа, видими при двойно увеличение.

При определяне на общия микробен брой, 1 ml от тестовата вода се добавя към стерилна чаша на Петри и се изсипват 10-12 ml топъл (44 ° C) разтопен хранителен агар. Средата се смесва внимателно с вода, равномерно и
без въздушни мехурчета, разпределете по дъното на чашата, след това покрийте с капак и оставете, докато се втвърди. Културите се инкубират в термостат при 37 °C за 24 часа. Общият брой на колониите, израснали в двете блюда, се преброява и се определя средната стойност. Крайният резултат се изразява чрез броя на образуващите колонии единици (CFU) в 1 ml тестова вода. 1 ml питейна вода трябва да съдържа не повече от 50 CFU

Дефиниция на колиформи
В същото време се определят обикновените колиформни бактерии - TCB и термотолерантните колиформни бактерии - TCB.

OKB са грам-отрицателни пръчици без образуване на спори, които ферментират лактозата до киселина и газ при температура 37°C за 24-48 часа. TKB са включени в групата на OKB, те имат своите симптоми, но аз ферментирам при 44 ° C. За определяне на ентеробактериите използвайте метода на мембранния филтър или титруване.

Микробно число - основният критерий за оценка на микробиологичното състояние на питейната вода,въз основа на действащите нормативни документи, е TMC (общо микробно число), което характеризира броя на аеробните и анаеробните бактерии в един милилитър вода, образувани на ден при температура 37 градуса, в хранителна среда. Този индикатор е практически незаменим за бързото откриване на масивно микробно замърсяване.

За определяне на общия микробен бройедин милилитър от тестовата вода се добавя към стерилно петриево блюдо, след което се изсипват 10-15 ml топъл (около 44 ° C) разтопен хранителен агар. Средата внимателно се смесва с вода, разпределя се равномерно и без въздушни мехурчета по дъното на блюдото, след което се затваря с капак и се оставя в блюдото на Петри, докато се втвърди. Същото се прави и в друга чаша. Инокулациите се инкубират в термостат при температура 37 °C за 24 часа. След това общият брой на колониите, израснали в двете блюда, се преброява под микроскоп при 2x увеличение и се определя средната стойност. В 1 ml питейна вода не трябва да има повече от 50 CFU.

По отношение на водата от източници с естествен произход се разграничават микроорганизми - сапробионти и катаробионти, които се считат за индикатор за микробиологично замърсяване на водните тела. Към групата на катаробионтите(Катароби) Те включват микроорганизми, които живеят само в чиста изворна вода. Група сапробионти(сапроби) съставлява микрофлората на всички останали сладководни тела.

Сапробността се наричаопределени физиологични характеристики на определен вид микроорганизми, които определят способността им да живеят във водна среда, замърсена с органични съединения. Индексите на сапробност за водни обекти се изчисляват въз основа на сапробността на отделните видове организми, които съставляват комплекса от тяхната микрофлора.

Таблицата по-долу показва зависимостта на класа на чистота и нивото на замърсяване на природните водоеми от микробиологичните параметри на водата в тях.

маса 1

Индикаторите за микробиологично замърсяване са приложими в много индустриални сектори. Изискванията за чистота на резервоарите се регулират от GOSTs, технически спецификации (технически условия) и друга нормативна документация и имат значителни разлики по отношение на различните обекти. Например, експлоатацията на плувен басейн е невъзможна без разработването на програма за контрол на производството. Той трябва да бъде одобрен от главния лекар на Държавния санитарен и епидемиологичен надзор на дадената административно-териториална единица и да получи разрешение от ръководството на организацията, която възнамерява да управлява това плувно съоръжение.

таблица 2

Таблица 3

Уважаеми господа, ако имате нужда от коригиране на показателите за микробиологично замърсяване на природни или промишлени води, моля, направете запитване до специалистите на компанията Waterman. Ще разработим оптимална схема за дезинфекция на водата.

Тъй като този метод за анализ на водата включва само определяне на общия брой колонии - образуващи бактерии от различни видове, неговите резултати не могат ясно да преценят наличието на патогенни микроби във водата. Но високото микробно число показва общо бактериологично замърсяване на водата и висока вероятност за наличие на патогенни организми.

При анализ на водата е необходимо да се контролира не само съдържанието на токсични химикали, но и броят на микроорганизмите, които характеризират бактериологичното замърсяване на питейната вода TMC - общо микробно число , В централизираната водоснабдителна вода този брой не трябва да надвишава 50 CFU /ml, а в ямки и ямки - не повече от 100 CFU/ml

— питейна вода от централен водопровод (чешмяна вода);

— питейна вода от нецентрализирано водоснабдяване;

— вода от повърхностни и подземни водоизточници;

- отпадъчни води;

— вода на крайбрежните зони на моретата;

- вода в басейна.

1. Общо микробно число (ТМЧ) - броят на мезофилните бактерии в 1 ml вода.

3. Броят на спорите на сулфит-редуциращи клостридии в 20 ml вода.

4. Брой колифаги в 100 ml вода.

Общо микробно числое броят на мезофилните аеробни и факултативно анаеробни микроорганизми, способни да образуват колонии върху хранителен агар при температура 37 °C за 24 часа, видими при двойно увеличение.

Дефиниция на колиформи
В същото време се определят обикновените колиформни бактерии (TCB) и термотолерантните колиформни бактерии (TCB).

Микробното число е основният критерий за оценка на микробиологичното състояние на питейната вода,въз основа на действащите нормативни документи, е TMC (общо микробно число), което характеризира броя на аеробните и анаеробните бактерии в един милилитър вода, образувани на ден при температура 37 градуса, в хранителна среда.

Показатели за качество на питейната вода във водоснабдителните системи.

Този индикатор е практически незаменим за бързото откриване на масивно микробно замърсяване.

(основен метод)

Методът се основава на филтриране на определен обем вода (300 ml) през мембранни филтри, отглеждане на култури върху диференциално диагностична среда с лактоза (Endo) и последваща идентификация на колониите по културни и биохимични характеристики.

Подготвените за анализ мембранни филтри (варени или стерилизирани по друг начин) се поставят със стерилни пинсети във фунията на филтърния апарат. Във фунията на уреда се налива измерено количество вода и се създава вакуум. След филтриране, филтърът се отстранява и без да се обръща, се поставя върху повърхността на хранителната среда Endo.

Можете да поставите 3 филтъра на една чаша. При изследване на питейна вода се филтрират 3 обема от 100 ml. когато се анализира вода с неизвестно качество, препоръчително е да се филтрират други обеми вода, за да се получат изолирани колонии върху филтъра (10,40, 100 и 150 ml).

Съдовете с филтри се инкубират обърнати в термостат при 37°С за 24 часа.

Ако няма растеж по филтрите или ако са се развили нетипични филмови, плесенясали или дифузни колонии, се дава отрицателен резултат. TCB и TCB отсъстват в 100 ml от тестваната вода.

Когато върху филтрите се появят типични изолирани лактозо-положителни (тъмночервени с отпечатъци на гърба на филтъра) колонии, техният брой се преброява и те започват да потвърждават принадлежността си към ОКБ и ТКБ.

Извършва се микроскопия на петна от 3-4 колонии, оцветени по Грам (грам-отрицателните се вземат предвид);

Определя се наличието на оксидаза (вземат се предвид оксидазо-отрицателните, тъй като оксидаза-положителните грам-отрицателни пръчки не принадлежат към ентеробактерии, но могат да бъдат например псевдомонади);

Ферментацията на лактозата до киселина и газ се определя при температура от 37 ° C, което е важно за слабо оцветените колонии и тяхната връзка с TCB, и температура от 44 ± 0,5 ° C, за да се реши въпросът за тяхната принадлежност към TCB.

Извършване на оксидазен тест

Част от оцветената колония се нанася върху хартия, навлажнена с 1% алкохолен разтвор на α-нафтол и 1% воден разтвор на диметилфенилендиамин. реакцията се счита за положителна, ако се появи син или виолетов цвят в рамките на 1 минута, максимум 4 минути. Оксидаза-позитивните колонии не се броят и не се подлагат на по-нататъшно изследване.

Можете да прехвърлите филтъра с колониите върху хартия, навлажнена с реагента. Можете да използвате готови хартиени системи (SIBs), навлажнени с дестилирана вода.

Части от колонии от грам-отрицателни оксидаза-отрицателни бактерии се тестват за способността да ферментират лактоза. Това използва полутечна среда с лактоза и pH индикатор. Засяването се извършва чрез шприцоване на 2 епруветки на дъното. Единият се инкубира при температура 37±1oC за 24-48 часа, за да се потвърди връзката с TKB, другият при температура 44±0,5oC за 24 часа, броенето е възможно след 4-6 часа, за да се потвърди наличието на TKB .

Когато колониите се поставят върху филтъра, те се пресяват, след което получените изолирани колонии се идентифицират. Колониите се броят като OKB - ако са червени на Endo, те съдържат грам-отрицателни оксидаза-отрицателни пръчки, които разлагат лактозата при температура 37 oC до киселина и газ. Колониите се считат за TKB, ако съдържат грам-отрицателни оксидазо-отрицателни пръчици, които ферментират лактозата при температура 44 oC до киселина и газ (схема № 2).

СХЕМА №2

Дата на публикуване: 2014-11-02; Прочетено: 1811 | Нарушаване на авторските права на страницата

studopedia.org - Studopedia.Org - 2014-2018 (0.001 s)…

Общо микробно число

При анализ на водата е необходимо да се контролира не само съдържанието на токсични химикали, но и броят на микроорганизмите, които характеризират бактериологичното замърсяване на питейната вода TMC - общо микробно число , В централизираната водоснабдителна вода този брой не трябва да надвишава 50 CFU /ml, а в ямки и ямки - не повече от 100 CFU/ml

— питейна вода от централен водопровод (чешмяна вода);

— питейна вода от нецентрализирано водоснабдяване;

— вода от повърхностни и подземни водоизточници;

- отпадъчни води;

— вода на крайбрежните зони на моретата;

- вода в басейна.

1. Общо микробно число (ТМЧ) - броят на мезофилните бактерии в 1 ml вода.

3. Броят на спорите на сулфит-редуциращи клостридии в 20 ml вода.

4. Брой колифаги в 100 ml вода.

Принципи на нормиране на питейната вода

Същото се прави и в друга чаша. Инокулациите се инкубират в термостат при температура 37 °C за 24 часа. След това общият брой на колониите, израснали в двете блюда, се преброява под микроскоп при 2x увеличение и се определя средната стойност. В 1 ml питейна вода не трябва да има повече от 50 CFU.

Цел на работата: определяне на микробното число на чешмяна вода.

Микробното число дава представа за общото замърсяване на водата с аеробни сапрофити, които представляват само част от общия брой микроби във водата. Съществува обаче пряка връзка между микробното число и вероятността от наличие на патогенни микроорганизми във водата.

Микробното число на чешмяната вода не трябва да надвишава 50 бактериални колонии на 1 ml.Определя се чрез инокулация върху хранителна среда - месопептонен агар (МПА). Методът се състои в идентифициране на бактерии в 1 ml вода, които са способни да се развиват върху хранителен агар при температура 37 0 C в продължение на 24 часа, образувайки колонии, видими при 2-5 пъти увеличение. Анализът, извършен по този начин, не може да определи напълно всички бактерии във водата, а само тези, които се развиват при условията на анализ. Следователно дефиницията дава не абсолютна, а относителна бактериологична характеристика на водата. Този метод може да сравни бактериалното замърсяване на различни места от водоизточника, както и на едно място в различни периоди от годината.

Инструменти и оборудване

Термостат; микроскоп; Петри; МРА хранителна среда; дестилирана вода.

Материали:вода от резервоар и чешмяна вода.

Завършване на работата

1 ml от тестваната питейна вода се пипетира в петриево блюдо (ако се тества отпадъчна вода, тя се разрежда няколко пъти със стерилна вода), след което пробата се напълва с 10–12 ml охладен хранителен месен пептон агар (MPA ), която има температура приблизително 45 0 C. Съдържанието се разбърква бързо, като чашата се накланя и върти внимателно върху повърхността на масата. Необходимо е да се избягва образуването на въздушни мехурчета, незабележими части от дъното на чашата и контакт на средата по ръбовете и капака на чашата. След като средата се втвърди, чашата се поставя в термостат и се държи при температура 37 0 С в продължение на 24 часа. През това време в петриевата паничка растат колонии, които се виждат с увеличение 2–5 пъти. Обикновено растат от 30 до 300 колонии.

За да се преброи броят на колониите, чашата се поставя обърната надолу върху черен фон. За да ускорите изчисляването на броя на колониите X, определете броя на колониите в 1 cm 2 и умножете това число по площта на чинията

С = π r

където r е радиусът на чашата.

х = nS

Където н– брой колонии.

Въз основа на получените данни се определя степента на замърсяване на водата.

Таблица Степен на замърсяване на водата в зависимост от общия брой бактерии

Характеристики на водата

Брой бактерии в 1 мл

много чисто

умерено замърсени

замърсени

много мръсно